奶牛性控凍精使用技術操作要點及注意事項：性別控制，是指雌性動物通過人為地干預而繁殖出人們所期望性別后代的一種繁殖新技術。奶牛XY精子分離性別控制技術是指將牛的精液根據(jù)含X染色體和Y染色體精子的DNA含量不同而把這兩種類型的精子有效的進行分離后，將含X染色體的精子分裝冷凍后，用于牛的人工授精，而使母牛懷孕產(chǎn)母牛犢的技術；這種根據(jù)精子X、Y染色體的不同而分裝冷凍的凍精就叫性控凍精；使用我公司的牛性控凍精產(chǎn)品對發(fā)情母牛進行配種可以使90%以上的受配懷孕母牛產(chǎn)母牛犢。液氮罐

一、奶牛性控凍精在生產(chǎn)中使用的重要意義

（一）奶牛公、母犢牛的價格差一般在1000元以上，母牛同樣的飼養(yǎng)管理成本和懷孕時間，用性控凍精冷配，可以使懷孕母牛的產(chǎn)犢效益顯著提高。

（二）使用性控凍精可以顯著的提高母牛數(shù)和群體產(chǎn)奶量，這是因為與常規(guī)冷凍精液配種相比，使用性控凍精，可以大量的繁殖出母牛后代，終使母牛數(shù)和產(chǎn)奶量都得到提高，從而提高生產(chǎn)效益。

（三）使用性控凍精可繁殖出大量的優(yōu)質高產(chǎn)的母牛后代，可以加快牛群的淘汰速度，提高生產(chǎn)效率。

以上三點都說明在使用性控凍精后可以顯著的提高奶牛產(chǎn)業(yè)的生產(chǎn)效益，同時與胚胎工程技術的結合可以使牛的品種改良一步到位。

二、性控凍精的特點

（一）解凍后精子活力要比常規(guī)冷凍精液高，其原因是死精子和部分畸形精子在分選時被篩除；

（二）性控凍精細管分裝精子的密度顯著地低于非性控凍精（性控：230萬個/0.25ml，非性控：2500萬個/0.25ml）；

（三）奶牛含X染色體性控冷凍精液的存活時間相對于常規(guī)冷凍精液要短。

三、使用性控凍精進行人工授精的母牛的選擇按下列步驟和標準執(zhí)行。

首先是品種的選擇，選擇中、高產(chǎn)奶牛及其后代做為使用對象；其次是年齡和胎次，首選初配母牛和生產(chǎn)三胎內(nèi)母牛；最后是營養(yǎng)和健康，膘情適中健康無疾病和繁殖疾病史。

四、性控凍精輸精技術的操作要點和注意事項

（一）準確的發(fā)情觀察（步驟）

1、每天早晚對放牧或在運動場運動牛群進行至少半小時的觀察，記錄接受爬跨的牛號；

2、不能放牧或不能在運動場運動的牛，等到牛吃草擠奶后靜臥休息時，觀察其尾部分泌物的粘性和顏色，記錄牛號；

3、對外陰紅腫爬跨其它牛只騷動不安的牛只記錄牛號；

4、對上述三種情況記錄的牛只在觀察完成后立即查閱繁殖記錄，剔除產(chǎn)后時間不合適、正在進行繁殖疾病治療和其它不適合進行配種的牛只；

5、對觀察到上述癥狀的適合冷配的空懷牛只，在10-12小時后進行直腸檢查，首先判斷子宮的大小和質地，然后檢查兩側卵巢是否正常，是否有排卵卵泡，如果有排卵卵泡，根據(jù)卵泡的大小和質地推測排卵時間，判斷在8小時之內(nèi)排卵并適合進行冷配的牛只立即進行配種，對適合使用性控凍精的牛只（本手冊第三條）用性控凍精配種，不適合的用常規(guī)凍精配；并做好包括子宮、卵巢情況和發(fā)情時間及輸精時間和部位等內(nèi)容的詳細記錄；

（二）輸精操作要點

1、使用性控凍精配種時，配種時間盡量控制在排卵前6小時之內(nèi)或排卵后4小時之內(nèi)；使用性控凍精時，盡量縮短解凍與輸精之間的時間，好是解凍一支輸一支；

2、解凍方法：從液氮罐中取凍精時，提漏中的凍精不可超過液氮罐口，如果10秒鐘內(nèi)還沒有將凍精取出，應將凍精立刻沉入液氮中然后再提到罐口重復操作；單支凍精取出后在空氣中先停留5秒左右，然后放入38-40攝氏度清水中10秒中后取出用干脫脂棉擦干后剪斷封口，裝入輸精器準備輸精；

3、輸精器好是使用一次性外套的，輸精時要保證輸精器的無菌和與輸精器接觸的部位及器具的干凈衛(wèi)生；輸精部位一般在排卵側子宮角或者是采用子宮體后拉法，也就是說，如果能夠準確判斷出排卵側并能使輸精器順利的放到排卵側子宮角就采用子宮角輸精，否則，采用子宮體輸精器后拉發(fā)法輸精，保證兩側子宮角都能有精子進入和受精。

（三）跟蹤觀察

1、對于已經(jīng)參加配種的牛只，在8小時之內(nèi)進行第二次直腸檢查卵泡側；如果已經(jīng)確認排卵，做好配種記錄；沒有排卵的參配牛只采取補救措施，本條第（四）；

2、其它適合配種的牛只重復本手冊第四條第（一）的第5步操作程序。

3、配種后在下個情期繼續(xù)觀察是否有發(fā)情表現(xiàn)，如果受配母牛連續(xù)兩個情期以上沒有發(fā)情，在配種60天后，直腸檢查確定是否妊娠；對于沒有妊娠的母牛采取補救措施---本條第（四）；

（四）補救措施

1、在冷配8小時之內(nèi)進行第二次直腸檢查卵泡側，對于沒有排卵的參配牛只，在推斷了排卵時間后要繼續(xù)適時輸精，并根據(jù)具體情況結合外源激素的使用。此類情況不妊娠與性控凍精的質量無關，主要是發(fā)情母牛的排卵時間與人工授精的時間沒有掌握好。

2、參配母牛在配種后的第一或第二情期觀察到了明顯的發(fā)情表現(xiàn)，在確認發(fā)情后要及時進行重復冷配，冷配時如果發(fā)現(xiàn)發(fā)情黏液不干凈或其它繁殖疾病，要停止冷配并采取相應的治療措施；如果對排卵時間把握不準確，就采用常規(guī)凍精進行復配。

五、合格冷配技術員的評估標準

1、耐心的、準確的發(fā)情觀察和鑒定：主要是通過外觀觀察包括是否接受爬跨和黏液等，最終通過直腸檢查卵巢是否有排卵卵泡來確定是否發(fā)情和什么時間輸精。－－如果能做到這一點可以得到30分

2、直腸把握輸精器能熟練通過牛的子宮頸并在整個操作過程中做到無菌操作。－－如果能做到這一點可以得到30分

3、繁殖疾病的及時發(fā)現(xiàn)和及時、有效的預防與治療的能力（激素使用）冷配技術人員在人工授精操作之外能夠及時的對適繁母牛做到包括子宮、卵巢和其它繁殖器官疾病的有效的預防和治療，充分的保證繁殖母牛在合適的妊娠時間妊娠。－－如果能做到這一點可以得到30分。

4、其它：認真的做好繁殖記錄，凍精的保存、解凍和顯微鏡檢查活率的技能－－如果能做到這些可以得到10分

對以上四點熟練而系統(tǒng)的掌握的牛人工授精技術人員才算是一個技術精湛、在生產(chǎn)中能夠為養(yǎng)牛事業(yè)做出貢獻并為自己創(chuàng)造美好生活的人！液氮罐

六、影響人工授精受胎率的主要因素

（一）母牛自身的因素：母牛的健康狀況對受胎是非常重要的，健康的牛激素水平才正常，才能正常排卵和保證卵子的受精和維持胎兒的正常的發(fā)育，所以要想得到高的人工授精受胎率，保證繁殖母牛的健康和繁殖器官的健康是必須的；

（二）冷配技術人員的技術水平是能夠讓健康空懷母牛受胎率得到提高的必要條件（技術人員的評估標準已經(jīng)說過了）；

（三）當一個健康的適配母牛經(jīng)過一個高技術水平的人工受精員的冷配之后，仍然沒有懷孕或整個牛群的懷孕率依然很低時，就要考慮凍精的因素，主要是從凍精自身的活率是否很高和在保存及解凍過程是否出現(xiàn)了問題等環(huán)節(jié)逐個分析；所以為了避免凍精在使用和保存中出現(xiàn)問題，最好定期抽檢凍精的品質，簡單的就是采用光學顯微鏡進行檢查。

由此可見，在使用人工授精技術進行配種時，凍精只是影響受胎率的一個因素，當受配母牛的懷孕率較低時，我們要綜合分析，才能發(fā)現(xiàn)問題的原因和找到提高受胎率和情期受胎率的辦法。

七、同期發(fā)情技術的應用

（一）適合進行同期發(fā)情處理的牛：空懷，健康，產(chǎn)后時間合適，繁殖狀況正常，無繁殖疾病；

（二）目前可以讓牛同期發(fā)情的辦法很多，但在生產(chǎn)中方便實用的是以下兩種方法。

方法一：直檢有黃體時，直接采用PG肌注或宮注，此方法可使處理母牛在處理后72小時的發(fā)情排卵率達到70%以上；

方法二：對于卵巢靜止和無黃體的母牛，采用放置CIDR在9天后于撤出CIDR時注射PG，兩天后開始觀察發(fā)情并根據(jù)發(fā)情情況適時配種；或者間隔11天兩次肌注PG的方法；在第二次注射PG兩天后開始觀察發(fā)情并根據(jù)發(fā)情情況適時配種。

八、常見繁殖疾病的預防和治療原則

（一）子宮疾病的臨床診斷和治療原則

1、外觀觀察：尾部分泌物的顏色、氣味，生殖器官的外部形狀；發(fā)情時粘液的情況并結合產(chǎn)后時間來與正常情況對比后做出初步的判斷；

2、直腸檢查：子宮的大小、質地、是否對稱等從形狀和質地的比較并結合外觀觀察來終得出診斷結論；

3、預防為主：首先，保持牛床環(huán)境衛(wèi)生的清潔；其次，清洗子宮和輸精時做好無菌工作，不重復使用已經(jīng)污染的器具，避免交叉感染；最后，對產(chǎn)后的母牛的生殖系統(tǒng)做好及時的保健和預防及治療。

4、治療方法（對因、對癥）：沖洗，子宮注射，全身癥狀的消除；

5、常用藥物：消毒防腐、抗生素、激素和中草藥治療。

（二）卵巢機能性障礙的臨床診斷和治療原則

1、通過發(fā)情周期和發(fā)情時間、癥狀來判斷：周期是否固定時間是否正常、發(fā)情的持續(xù)時間、癥狀是否正常；

2、直腸檢查兩側卵巢：大小、質地是否正常，通過以上兩點來診斷卵巢機能是否正常；

3、卵巢囊腫、卵泡囊腫的治療原則：采用物理方法、抗生素、激素的使用來治療；

4、排卵延遲的治療原則：調整輸精時間和使用激素，激素一般采用肌注促排2號和促排3號；

5、卵泡閉鎖和交替發(fā)育的治療原則：加強飼養(yǎng)管理和使用外源生殖激素。液氮罐